Nonalcoholic steatohepatitis is characterized by fatty accumulation in hepatocyteswith hepatocytes ballooning and lobular inflammation. It is thought that NASHoccurs as a result of factors such as oxidative stress and insulin resistancethat develops secondary to simple steatosis in the hepatocytes.Autophagy is a type of programmed cell death. Also it is believed that autophagycontribute to viability through the lysosomal destroying the intracellular components.It says that autophagy is a cell protector mechanism. Melatonin regulating thecircadian rhythms is a powerful antioxidant. There are numerous studies about thepotent effects of melatonin on NASH in the literature. In the light of literature, ourhypothesis is that synergistic effects of melatonin and autophagy may blockprogression of NASH through the decreasing lipid accumulation and oxidative stress.To achieve this goal, we used HepG2 cell line. After the starvation, weincubate the cell for 24h with 1mM (0,66OA+0,33PA) FFA. Cells stained with OROfor indicating fat accumulation. After the fat accumulation, we treated cells with bothmelatonin and rapamycin for 24h. Thereafter we analyzed the cells for proliferation,viability and intracellular lipid content.We observed that melatonin has beneficial effect for cell viability, cellsurvival and reduction of intracellular lipid accumulation in fatty cells. However weobserved that melatonin enhance uptake of FFAs when cells were treated withmelatonin and FFAs concurrently. We applied the different concentration ofrapamycin to observe the effects of rapamycin on fat accumulation. As aconsequence, rapamycin has no effect to intracellular fat accumulation, when cellswere treated with rapamycin and FFAs concurrently. Nevertheless, after the fataccumulation, intracellular lipid content is reduced by rapamycinapplication. Also some concentration of rapamycin has beneficial effect for cellviability and cell survival.

Alkolik olmayan karaciğer iltihabı (NASH) hepatositlerde yağlanmanın yanındabalonlaşma ve iltihabi infiltrasyon görülmesiyle karakterizedir. Bu hastalığınhepatositlerdeki basit yağlanmaya sekonder geliĢen insülin direnci ve oksidatif stresgibi etkenler sonucunda meydana geldiği düşünülmektedir.Otofaji programlı bir hücre ölüm tipidir. Aynı zamanda hücre içi bileşenlerilizozomal yıkıma uğratarak hücre içi geri dönüşüm mekanizması aracılığıylacanlılığa katkı sağladığı düşünülmektedir. Otofaji bu yönüyle bir sağ kalımmekanizması olarak karşımıza çıkmaktadır. Sirkadyal ritmi düzenleyen melatonin isegüçlü bir antioksidandır. NASH üzerine etkili olduğuna dair birçok çalışmamevcuttur. Literatür ışığında otofajinin ve melatoninin sinerjik etkisinin, hücreiçerisinde birikmiş lipit moleküllerini ve oksidatif stresi ortadan kaldırarak NASH‟ıngelişimine engel olabileceğini, oturmuş olan yağlanmayı ise geriletebileceğinidüşündük.Bu amaçla HepG2 hücreleri kullanılarak in vitro ortamda hücrelere 12 saatlik açlığınardından 1mM (0,66mM OA + 0,33mM PA) konsantrasyonunda FFA uygulanmış ve24 saatlik inkübasyona bırakılarak yağlanmanın oluşumu sağlanmıştır. Yağlanmanıngösterilmesi için hücreler ORO ile boyanmışlardır. Yağlanma sonrasında hücreleremelatonin ve rapamisin uygulanarak 24 saat inkübasyon sağlanmıştır. İnkübasyonsonralarında canlılık, proliferasyon ve hücre içi lipit miktar analizleri yapılmıŞtır.Analizler neticesinde yağlanmış hücrelerde melatoninin canlılık ve sağ kalım üzerineolumlu etkisinin olduğu ve hücre içi yağ miktarını azaltma yönünde etkiye sahipolduğu, fakat normal hücrelere FFA ile uygulandığında yağ miktarını arttırıcı yöndeetki ederek hücrenin daha fazla yağlanmasına neden olduğunu gözlemledik.Rapamisinin ise normal hücrelerin yağlanması evresinde uygulandığında yağlanmaoluşumuna herhangi bir etkisinin olmadığını fakat yağlanmış hücrelere yağlanmasonrası uygulandığında hücre içerisindeki yağ miktarını düşürücü etki gösterdiğinigözlemledik. Ayrıca rapamisinin de uygun konsantrasyonda canlılık veproliferasyona olumlu yönde katkı sağladığını da gözlemledik.