The Role of Combination of 5-Fluorouracil, Leptin and Leptin Inhibitor inChemotherapeutic Resistance of Pancreatic CancerAim: Pancreatic cancer is one of the most aggressive tumors without targetedtherapy. One of the chemotherapy agents used in PC treatment is 5-FUchemotherapeutic resistance develops frequently in 5-FU chemotherapy process. Theaim of this study was to investigate the possible role of leptin and its antagonist SHLAfor leptin inhibition to overcome chemotherapy resistance in 5-FU treatment treatmentfor PC.Materials and Methods: In this study, the cytotoxicity of 5-FU, leptin and,SHLA was determined by MTT method in PC cell lines, AsPC-1, MIA PaCa-2 andPanc-I. The effects of combinations of 5-FU, leptin and SHLA in PC cell lines onexpressions of genes involved in 5-FU chemotherapy resistance and apoptotic caspase3, 8 and 9 genes were determined by RT-PCR. The impacts of molecules on genomicDNA damage and cell cycle were detected by COMET and flow cytometry,respectively.Results: The sensitivity of 5-FU of PC cell lines, AsPC-1, MIA PaCa-2 andPanc-I were different from each other. No cytotoxic effects were detected when leptinand SHLA were used alone.It has been found that 5-FU (at IC50 values for each cell lines), leptin (0.1µM)and SHLA (1000 ng) change the expressions of 5-FU resistance genes DPD, hENT1,TP, TS, MDR1 and MRP5, and that single or combinational usage of these moleculescan trigger the apoptosis in PC cells. In addition, there was a significant differencebetween the groups in PC cell lines in terms of DNA damage and cell cycles in singleand combined administration of 5-FU, leptin and SHLA (p≤0.001).Conclusion: 5-FU sensitivity of the cells in the PC varies according to the celltype. In this study, it was concluded that the use of leptin and/or SHLA in combinationwith 5-FU may be a new therapeutic approach to overcome chemotherapeutic resistancein the treatment of PC. The effects of leptin and SHLA on the expression of genes in the5-FU resistance pathway and their therapeutic effects in treatment of PC have beendemonstrated for the first time in this study.

Pankreas Kanseri Kemoterapötik Direncinde 5-Florourasil, Leptin ve LeptinĠnhibitörü Kombinasyonunun RolüAmaç: PK hedefe odaklı tedavisi bulunmayan en agresif tümörlerden biridir. PKtedavisinde kullanılan kemoterapi ajanlarından biri de 5-FU'dur. 5-FU kemoterapisürecinde kemoterapötik direnç sıkça geliĢmektedir. Bu çalıĢmada, PK'de, 5-FUkemoterapi direncinin üstesinden gelebilmek için 5-FU tedavisinde leptin ve leptininhibisyonu için antagonist SHLA'nın olası rolünün araĢtırılması amaçlanmıĢtır.Materyal ve Metot: ÇalıĢmada AsPC-1, MIA PaCa-2 ve Panc-I PK hücreserilerinde 5-FU, leptin ve SHLA'nın sitotoksisitesi MTT yöntemiyle saptanmıĢtır. PKhücre serilerinde 5-FU, leptin ve SHLA moleküllerinin kombinasyonlarının 5-FUkemoterapi direncinde rol alan genler ile apoptotik kaspaz 3, 8 ve 9 genlerininekspresyonları üzerindeki etkileri RT-PZR ile belirlenmiĢtir. Moleküllerin genomikDNA hasarı ve hücre döngüsü üzerindeki etkileri sırayla COMET ve akım sitometritestleri ile tespit edilmiĢtir.Bulgular: AsPC-1, MIA PaCa-2 ve Panc-I PK hücre serilerinin 5-FU duyarlılığıbirbirinden farklı bulunmuĢtur. Leptin ve SHLA tek baĢlarına kullanıldıklarındaherhangi bir sitotoksik etkisi saptanmamıĢtır. 5-FU (her bir hücre serisi için IC50değeri), leptin (0.1µM) ve SHLA (1000 ng)'nın 5-FU direnç genleri DPD, hENT1, TP,TS, MDR1 ve MRP5'in ekspresyonlarını değiĢtirdiği, bu moleküllerin PK hücrelerindetek veya kombine kullanımının apoptozu tetikleyebildiği saptanmıĢtır. Ayrıca, 5-FU,leptin ve SHLA'nın tek ve kombine uygulanmasında PK hücre serilerinde DNA hasarıve hücre döngüsü açısından gruplar arasında anlamlı bir farklılık saptanmıĢtır(p≤0.001).Sonuç: PK'da hücrelerin 5-FU duyarlılığı hücre tipine göre farklılıkgöstermektedir. Bu çalıĢmada, PK tedavisinde, 5-FU kemoterapötik direncininüstesinden gelebilmek için leptin ve/veya SHLA'nın 5-FU ile kombine edilerekkullanımının yeni bir tedavi yaklaĢımı olabileceği sonucuna varılmıĢtır. Leptin veSHLA'nın 5-FU direnç yolağında yer alan genlerin ekspresyonları üzerindeki etkisi ilePK tedavisindeki terapötik etkileri ilk kez bu çalıĢmayla gösterilmiĢtir.