Van Kedisi Eritrositi’nden 6-Fosfoglukonat Dehidrogenaz Enzimi (E.C. 1.1.1.44)’nin Saflaştırılması, Karakterizasyonu ve Kinetik Özellikleri

Serpil Kılıç

Makale detayları

Van Kedisi Eritrositi’nden 6-Fosfoglukonat Dehidrogenaz Enzimi (E.C. 1.1.1.44)’nin Saflaştırılması, Karakterizasyonu ve Kinetik Özellikleri

Yazarlar:

Serpil Kılıç

Yayıncı:

Ataturk University

Dergi:

Atatürk University Journal of Veterinary Sciences 2017 Vol.12 Issue 2, pp.187-194

Belge Tipi:

Makale

Yayın Tarihi:

10/2017

Belge Dili:

Türkçe

Document ID (Org No.):

2000686487

Sıklık:

Aylık

eISSN:

2822-3608

Özet:

 


In this study, 6-phosphogluconate dehydrogenase enzyme
(6PGD; E.C.1.1.1.44)  was purified from
erythrocyte the Van Cat by affinity chromatography. The inhibitor effect of
Netilmicin sulphate, Ampicillin and Amoxicillin were also examined. Enzyme
activity was measured by spectrophotometer according to Beutler method at 340
nm. Then the optimum pH and optimum temperature of the enzyme were determined
to be 8.0 and 50 ° C, respectively. In order to control the purification of
enzyme, sodium dodecylsulfate-polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) was
used. The
purification rate for erythrocyte 6PGD was found as 1787. KM and Vmax
were also determined for NADP+ and 6PGA as substrates. The inhibitor
effect of Netilmicin sulphate, Ampicillin and Amoxicillin were also examined and Ki
values and the types of inhibition were determined by the Lineweaver-Burk
graph. 

.

 


Bu çalışmada, 6-fosfoglukonat dehidrogenaz enzimi
(6PGD; E.C.1.1.1.44) Van Kedisi eritrositinden afinite kromatografisi ile
saflaştırıldı. Netilmicin sülfat, Ampicillin ve Amoxicillin’nin inhibitor
etkisi incelendi. Enzim aktivitesi Beutler metoduna göre spektrofotometre ile
340 nm’de ölçüldü. Sonra enzimin optimum pH ve optimum sıcaklığı sırasıyla 8.0
ve 50 0C olarak tespit edildi. Enzimin saflığı sodyumdodesilsülfat-
poliakrilamit jel elektroforezi (SDS-PAGE) ile kontrol edildi. 6PGD eritrositi
için saflaştırma oranı 1787 olarak bulundu. NADP+ ve 6PGA
substratları için KM ve Vmax değerleri hesaplandı. Netilmicin
sülfat, Ampicillin ve Amoxicillin’nin inhibitor etkileri incelendi, Ki
değerleri ve inhibisyon tipleri Lineweaver-Burk grafiğinden tespit edildi.

.

Makale detayları

Van Kedisi Eritrositi’nden 6-Fosfoglukonat Dehidrogenaz Enzimi (E.C. 1.1.1.44)’nin Saflaştırılması, Karakterizasyonu ve Kinetik Özellikleri

Yazarlar: Serpil Kılıç

Yayıncı: Ataturk University

Dergi: Atatürk University Journal of Veterinary Sciences 2017 Vol.12 Issue 2, pp.187-194

Belge Tipi: Makale

Yayın Tarihi: 10/2017

Belge Dili: Türkçe

Document ID (Org No.): 2000686487

Sıklık: Aylık

eISSN: 2822-3608

Sayı

Yazarlar:

Serpil Kılıç

Yayıncı:

Ataturk University

Dergi:

Atatürk University Journal of Veterinary Sciences 2017 Vol.12 Issue 2, pp.187-194

Belge Tipi:

Makale

Yayın Tarihi:

10/2017

Belge Dili:

Türkçe

Document ID (Org No.):

2000686487

Sıklık:

Aylık

eISSN:

2822-3608