SINIRLI BÖLGE MUTASYON YÖNTEMİ İLE MUTASYON FREKANSININBELİRLENMESİ İÇİN İÇ STANDART MOLEKÜLÜ KULLANIMI

Sinan SÜZEN; James M. PARRY

doi:https://doi.org/10.1501/Eczfak_0000000328

Makale detayları

SINIRLI BÖLGE MUTASYON YÖNTEMİ İLE MUTASYON FREKANSININBELİRLENMESİ İÇİN İÇ STANDART MOLEKÜLÜ KULLANIMI

Yazarlar:

Sinan SÜZEN | James M. PARRY

Yayıncı:

Ankara University

Dergi:

Journal of Faculty of Pharmacy of Ankara University 1999 Vol.28 Issue 1, pp.1-13

Belge Tipi:

Makale

Yayın Tarihi:

5/1999

Belge Dili:

Türkçe

Document ID (Org No.):

2000868382

Sıklık:

Üç Yıllık

eISSN:

2564-6524

pISSN:

1015-3918

DOI:

https://doi.org/10.1501/Eczfak_0000000328

Anahtar kelimeler:

Özet:

 

In order to overcome some problems associated with the effects of variables on in vitro
 amplification of specific DNA segments using polymerase chain reaction (PCR), an internal
 standard technique was included to restriction site mutation (RSM) method. The internal standard
 was designed with same nucleotide sequences as the target sequence but with a deletion so that
 differences in size could be used to distinguish the PCR products of the target and internal
 standard. The application of the internal standard usage in the RSM method was performed on the
 rat ras gene. N-methyl-N-nitrosourea (MNU) induced mutations were detected at frequencies 10-5
 at the H-ras gene in exon 1 at Hind III restriction enzyme recognition sequence. The use of internal
 standard successfully allowed the calculation of mutation frequency.

 

Spesifik DNA kısımlarının polimeraz zincir reaksiyonu (PCR) kullanarak in vitro
 çoğaltılması üzerine değişkenlerin etkisi ile ilişkili bazı problemleri gidermek için, iç standart
 tekniği sınırlı bölge mutasyon (RSM) metoduna katıldı. İç standart, eksilme dışında hedef dizilim
 ile aynı nükleotid diziliminde dizayn edildi. Böylece büyüklükteki farklılıklar hedef ve iç standart'ın
 ayırımı için kullanılabildi. RSM tekniğinde iç standart kullanımının uygulaması sıçan ras geninde  gerçekleştirildi. N-metil-N-nitrozaüre (MNU) ile indüklenmiş mutasyonlar 10-5 sıklıkla Hras
 geni ekson 1 'de HindIII restriksiyon enzim tanıma bölgesinde saptandı. İç standart kullanımı
 mııtasyon sıklığının hesaplanmasına başarılı bir şekilde olanak sağladı.

Makale detayları

SINIRLI BÖLGE MUTASYON YÖNTEMİ İLE MUTASYON FREKANSININBELİRLENMESİ İÇİN İÇ STANDART MOLEKÜLÜ KULLANIMI

Yazarlar: Sinan SÜZEN | James M. PARRY

Yayıncı: Ankara University

Dergi: Journal of Faculty of Pharmacy of Ankara University 1999 Vol.28 Issue 1, pp.1-13

Belge Tipi: Makale

Yayın Tarihi: 5/1999

Belge Dili: Türkçe

Document ID (Org No.): 2000868382

Sıklık: Üç Yıllık

eISSN: 2564-6524

pISSN: 1015-3918

DOI: https://doi.org/10.1501/Eczfak_0000000328

iç standart

ras

PCR

RSM

Sayı

Yazarlar:

Sinan SÜZEN | James M. PARRY

Yayıncı:

Ankara University

Dergi:

Journal of Faculty of Pharmacy of Ankara University 1999 Vol.28 Issue 1, pp.1-13

Belge Tipi:

Makale

Yayın Tarihi:

5/1999

Belge Dili:

Türkçe

Document ID (Org No.):

2000868382

Sıklık:

Üç Yıllık

eISSN:

2564-6524

pISSN:

1015-3918

DOI:

https://doi.org/10.1501/Eczfak_0000000328