Karaciğer Kanser Hücrelerinin Sitoplazmik Özellikleri ile Kültür Süreci İlişkisi: Konfokal Mikroskopik Karşılaştırmalı Kantitatif Bir Çalışma

Hatice İSAN; Ayşe Cilacı TOMBUŞ; Hüseyin Ozan DOĞRU; Gözde ŞANLI; Ranan Gülhan AKTAŞ

Makale detayları

Karaciğer Kanser Hücrelerinin Sitoplazmik Özellikleri ile Kültür Süreci İlişkisi: Konfokal Mikroskopik Karşılaştırmalı Kantitatif Bir Çalışma

Yazarlar:

Hatice İSAN | Ayşe Cilacı TOMBUŞ | Hüseyin Ozan DOĞRU | Gözde ŞANLI | Ranan Gülhan AKTAŞ

Yayıncı:

Maltepe University

Dergi:

Maltepe Tıp Dergisi 2016 Vol.8 Issue 3, pp.18-23

Belge Tipi:

Makale

Yayın Tarihi:

11/2016

Belge Dili:

Türkçe

Document ID (Org No.):

2000526899

Sıklık:

Üç Yıllık

eISSN:

2602-2915

Özet:

 

It was aimed to compare the changes of morphologic  features  the content of mitochondria, endoplasmic reticulum,  golgi apparatus and the actin filaments of the cell  of  the HepG2 cells, a cell line isolated from a patient having  hepatocellular carcinoma, with the cultivation period.  Materials And Methods: HepG2 cells were cultured  in incubators  37 C, 5% CO2  within DMEM  Dulbecco's  Modified Eagle Medium  including 10% Fetal Bovine Serum   FBS  and 1% Streptomycine-Peniciline,. The cells had  been observed for 10 days and fixed when they covered  30%, 60% of 100% of the culture surface. Indirect immunoflourescence  staining method had been used to label sitoplasmic  contents. The labeled areas were measured by  Zen and Image J image analysis system. The measurements  were graphically visualized.The Excel data analysis tool wass  used for the statistical analysis. The results were compared by  using the regression method and t test.  Results: Mitochondria, endoplasmic reticulum and golgi  content of the cells changed significantly. However amount  of the cytoplasmic actin filament in the cells remained similar.  Conclusions: Cytoplasmic organels of the liver cancer cells  changes according to the in vitro culture duration and the  cell density. No dramatic change is seen at the structure of  the cell cytoskeleton. Those changes of the cells at “proliferation”  stages might effect the experiments. The current  study demonstrates that the stage of the cultured cells during  proliferation might be crucial to determine the results of  the the studies.

 

Hepatosellüler karsinoma tanısı konulmuş bir hastadan  izole edilmiş olan HepG2 hücrelerinin morfolojik özelliklerindeki   sitoplazmik organellerden mitokondri, endoplazmik retikulum  ve golgi cisimciği ile hücre iskeletini oluşturan başlıca  filament tipi olan aktin filamentlerinin miktarının  değişimin  kültür süreci ile bağlantılı olarak değişiminin karşılaştırmalı  olarak değerlendirilmesi amaçlanmıştır.  Gereç ve Yöntem: 37 C'da, %5 CO2 içeren inkübatörlerde,  %10 Fetal Sığır Serumu  FBS  ile %1 Streptomisin-Penisilin  içeren DMEM  Dulbecco's Modified Eagle Medium  içerisinde  HepG2 hücrelerinin kültürleri yapıldı. 10 gün boyunca gözlenen  bu hücreler; kültür sürecinin üç ayrı döneminde  kültür  yüzeyinin %30, %60 ve %100'ünü kapladıkları dönemlerde   fikse edildi. İndirekt immunofloresan boyama tekniği ile ilgili  sitoplazmik yapılar işaretlendi. İşaretli alanlar Zen ve Image  J görüntü analiz programları kullanılarak ölçüldü. Sayısal  sonuçlar grafiksel olarak ve Excel veri çözümleme aracı kullanılarak  karşılaştırıldı. Sonuçlar regresyon ve eşleştirilmiş iki  grup arasında t-testi  farklı varyanslar varsayarak  yöntemi kullanılarak  karşılaştırıldı.  Bulgular: Kanser hücrelerinin mitokondri, golgi cisimciği ve  endoplazmik retikulum içeriğinde anlamlı bir değişiklik gözlenmesine  karşılık; sitoplazmik aktin filament varlığımda belirgin  bir farklılık gözlenmemiştir.  Sonuçlar: Karaciğer kanser hücrelerinin sitoplazmik organel  içeriği klasik kültür ortamında kültür sürecine, ortamdaki hücre  yoğunluğuna bağlı değişmektedir. Hücre iskeletinde belirgin  bir değişiklik olmamaktadır. Deneysel çalışmalarda; “çoğalma”  aşamasındaki kültür hücrelerinin morfolojik özelliklerinin  bu parametreler karşısındaki değişimi deneyelerin sonuçlarını  etkileyebilir. Bu nedenle, araştırmalarda hücrelerin çoğalma  aşamasınn hangi devresinde oldukları göz ardı edilmemelidir.

Makale detayları

Karaciğer Kanser Hücrelerinin Sitoplazmik Özellikleri ile Kültür Süreci İlişkisi: Konfokal Mikroskopik Karşılaştırmalı Kantitatif Bir Çalışma

Yazarlar: Hatice İSAN | Ayşe Cilacı TOMBUŞ | Hüseyin Ozan DOĞRU | Gözde ŞANLI | Ranan Gülhan AKTAŞ

Yayıncı: Maltepe University

Dergi: Maltepe Tıp Dergisi 2016 Vol.8 Issue 3, pp.18-23

Belge Tipi: Makale

Yayın Tarihi: 11/2016

Belge Dili: Türkçe

Document ID (Org No.): 2000526899

Sıklık: Üç Yıllık

eISSN: 2602-2915

Sayı

Yazarlar:

Hatice İSAN | Ayşe Cilacı TOMBUŞ | Hüseyin Ozan DOĞRU | Gözde ŞANLI | Ranan Gülhan AKTAŞ

Yayıncı:

Maltepe University

Dergi:

Maltepe Tıp Dergisi 2016 Vol.8 Issue 3, pp.18-23

Belge Tipi:

Makale

Yayın Tarihi:

11/2016

Belge Dili:

Türkçe

Document ID (Org No.):

2000526899

Sıklık:

Üç Yıllık

eISSN:

2602-2915